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domingo Carpa C3 - SNU
09:00 - 10:45 SNU
Simposio SNU_7: "Tendencias en Neurociencia en Uruguay".
 Coordinador
M. Borde
Bases neuroendócrinas de la flexibilidad comportamental durante el posparto.
 Expositora
Natalia Uriarte - Laboratorio de Neurociencias, Facultad de Ciencias, UdelaR (Uruguay)
El canal central como fuente de progenitores para la reparación de la médula espinal
 Expositor
Raúl Russo - IIBCE
Glía en la Esclerosis Lateral Amiotrófica: del laboratorio a la policlínica.
 Expositora
María Patricia Cassina - Facultad de Medicina (Uruguay)
| Conferencista invitado
Bases neuroendócrinas de la flexibilidad comportamental durante el posparto (#0389)
Natalia Uriarte| 1
1 - Laboratorio de Neurociencias, Facultad de Ciencias, UdelaR.
Resumen:
Clásicamente, el comportamiento maternal en la rata, y en mamíferos en general, ha sido entendido como una conducta altamente estereotipada que se extingue gradualmente a lo largo del período posparto. Sin embargo, experimentos de nuestro laboratorio muestran que esta conducta es flexible y que se adapta a las necesidades cambiantes tanto de las crías como del ambiente. Exploramos esta flexibilidad a través de analizar el comportamiento maternal y sus bases neurales a lo largo del período posparto así como el de madres con camadas superpuestas –hembras que cuidan dos camadas de diferentes edades simultáneamente-. Encontramos que la motivación maternal hacia crías con diferentes grados de desarrollo difiere entre el posparto temprano y el tardío. En estos períodos detectamos diferencias en el grado de organización de las redes perineuronales –involucradas en mecanismos de plasticidad- en el área preóptica media, región clave para la expresión de la motivación y el comportamiento maternal. Por otra parte, en experimentos con hembras con camadas superpuestas encontramos que los factores endócrinos –el perfil hormonal de la gestación tardía y el parto- tienen mayor relevancia que  la experiencia para la expresión de la flexibilidad y adaptación maternal.

Contacto: natiuria@gmail.com
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| Conferencista invitado
Glía en la Esclerosis Lateral Amiotrófica: del laboratorio a la policlínica (#0388)
Patricia Cassina 1
1 - Facultad de Medicina.
Resumen:
A pesar de varias décadas de investigación, todavía se desconoce la causa que lleva a la muerte neuronal progresiva en la enfermedad neurodegenerativa humana Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA). Tampoco existen tratamientos efectivos para prevenir o curar esta patología. En la ELA, las motoneuronas superiores e inferiores constituyen la población neuronal afectada. Hasta recientemente, el foco principal de los estudios ha sido precisamente la población de neuronas degenerantes, sin considerar su entorno celular, incluyendo células gliales como astrocitos y microglia. En los últimos 10 años, se ha planteado la hipótesis que los astrocitos jueguen un papel importante en la patogenia de la misma, basados en la observación de que frente al daño, las neuronas mueren pero los astrocitos proliferan y adoptan variados fenotipos adaptativos para proteger y/o dañar a las neuronas. Las transformaciones fenotípicas de los astrocitos están ligadas a alteraciones en la función mitocondrial y un aumento en la capacidad proliferativa comportamiento que se conoce como efecto Warburg. Recientemente, nuestro grupo ha encontrado en roedores SODG93A utilizados como modelos animales de ELA, revertir este fenotipo mediante el tratamiento con el modulador metabólico dicloroacetato (DCA). Este tratamiento determinó una restauración de la actividad mitocondrial a nivel de la médula espinal, una disminución de la proliferación y neurotoxicidad de los astrocitos, un retraso en la muerte neuronal y persistencia de una mejor actividad motora en los animales. Nuestros proyectos actuales buscan: a) profundizar en los mecanismos de toxicidad de los astrocitos a las motoneuronas, analizando la población de sus vesículas extracelulares b) establecer si los mecanismos propuestos operan también en los humanos con ELA, identificando posibles marcadores biológicos de la progresión de la patología.

Contacto: pcassina@fmed.edu.uy
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10:45 - 11:00
CAFÉ
11:00 - 12:30 SBF
Simposio SBF_3: Radiobiología y Genómica
 Coordinadora
Déborah Keszenman - CenUR Litoral Norte-Salto (Uruguay)
 Coordinadora
Nelida Rodriguez Osorio - UdelaR (Uruguay)
Daño al genoma y epigenoma espermático y su efecto sobre la fertilización.
 Expositor
Mariano Eliécer Acosta Lobo (Colombia)
Epigenómica del desarrollo embrionario en bovinos
 Expositora
Nelida Rodriguez Osorio - UdelaR (Uruguay)
Análisis de la capacidad radioprotectora de la infusión de Ilex paraguariensis y sus derivados bioactivos.
 Expositor
Nelson Bracesco (Uruguay)
Espectro de daños de ADN en células con inestabilidad genómica radioinducida
 Expositora
Déborah Keszenman - CenUR Litoral Norte-Salto (Uruguay)
| Conferencista invitado
Daño al genoma y epigenoma espermático y su efecto sobre la fertilización. (#0064)
Mariano Eliécer Acosta Lobo 1
1 - Universidad Nacional de Colombia sede Medellín.
Resumen:
El espermatozoide es una célula particular cuya función es  proporcionar el 50% del genoma nuclear que caracteriza un organismo diploide. Para esto, el espermatozoide pierde durante la espermiogénesis la mayoría de su citoplasma y organelas,  manteniendo solo las estructuras necesarias para la fecundación. Para que ocurra un normal desarrollo del embrión es crucial que los espermatozoides mantengan la integridad de su cromatina, membrana y un epigenoma, incluyendo algunos ARNs. Se ha establecido que el espermatozoide no solo contribuye con el ADN al desarrollo embrionario sino también con ARNs producidos durante la espermatogénesis y que regulan expresión génica temprana durante las primeras divisiones celulares. Precisamente, en los últimos años ha aumentado la evidencia  exhibiendo que los daños a la cromatina o ADN espermático pueden afectar negativamente la fertilidad y por ende el desarrollo embrionario, y que aunque es normal que en un eyaculado haya una proporción de espermatozoides con fragmentación del ADN, los individuos identificados como subfértiles o estériles generalmente tienen una proporción mayor de espermatozoides con ADN fragmentado que aquellos determinados como fértiles. Es por ello que las causas de la fragmentación del ADN  espermático y el daño a la cromatina, así como las técnicas para diagnosticarlas se ha convertido en un tema actual en medicina reproductiva. No obstante, a pesar del intenso interés clínico en la célula  espermática como un predictor de la fertilidad masculina, la calidad del ADN no se evalúa usualmente en un análisis rutinario de semen. Esto debido principalmente al hecho de que las tecnologías actuales para esta evaluación son logísticamente complejas y tecnológicamente sofisticadas. En esta presentación se mostrará una actualización en las causas de los daños al genoma y epigenoma espermático,  su efecto sobre la fertilización y cuáles son las principales técnicas para su evaluación, sus  ventajas y desventajas.

Contacto: meacosta@unal.edu.co
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| Conferencista invitado
Epigenómica del desarrollo embrionario en bovinos (#0260)
Nelida Rodríguez Osorio 1
1 - Universidad de la República.
Resumen:
Durante el desarrollo embrionario temprano ocurren grandes trasformaciones en el perfil epigenético (metilación global del DNA y modificaciones de las histonas), que determinan la expresión génica embrionaria. Durante los primeros clivajes, el DNA de origen paterno y materno son desmetilados de forma diferencial, para ser metilados de novo entre la etapa de mórula y blastocisto. Las múltiples modificaciones en las histonas contribuyen, a su vez al estado de “silenciamiento” o “actividad” de los genes. A pesar de su relevancia desde el punto de vista básico o aplicado, la epigenómica embrionaria aún se enfrenta a serias limitaciones. La primera de ellas, es la escasez de material que puede ser recuperado de embriones tempranos. En segundo lugar, está la variabilidad entre las células embrionarias, las cuales comienzan a diferenciarse para dar origen al trofectodermo y al embrioblasto. Pero la principal limitación es el hecho de que el cultivo in vitro de embriones es causante per se de alteraciones en las marcas epigenéticas. Usando pools de 5 embriones bovinos homogéneos, hemos obtenido suficiente DNA para estudiar el perfil global de metilación o el grado específico de metilación de genes particulares, mediante tratamiento con bisulfito de sodio seguido de High Resolution Melting HRM, o secuenciación masiva. Para evaluar la expresión génica, hemos evaluado RNA de pools de 3 embriones bovinos homogéneos mediante microarreglos, y PCR cuantitativa. Al comparar los resultados de embriones producidos in vitro con embriones en la misma etapa de desarrollo, obtenidos de vacas superovuladas e inseminadas, hemos encontrado diferencias significativas en el perfil de metilación del DNA, en la expresión génica y en las marcas de las histonas. Sin embargo, el modelo in vitro sigue siendo la mejor alternativa para estudiar la epigenética del desarrollo embrionario.

Contacto: nelida.rodriguez@unorte.edu.uy
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| Conferencista invitado
Análisis de la capacidad radioprotectora  de la infusión de Ilex paraguariensis y sus derivados bioactivos. (#0267)
Burix Mechoso 1; Lourdes Blanc 1; Pablo Bracesco 1; Verónica Sosa 1; Nelson Bracesco 1
1 - Fac. de Medicina.
Resumen:
La yerba mate presenta un alto contenido en polifenoles de conocido efecto antioxidante. En Uruguay el 85 % de la población es consumidora de “mate” y actualmente se sabe que esta infusión posee polifenoles, vitaminas y cofactores que podrían interferir en procesos patológicos de óxido reducción. Hipótesis: Los fenoles en ciertas condiciones pueden cortar cascadas redox y disminuir lesiones de ADN con alto potencial letal  y mutagénico; además el control del ciclo celular y la reparación de lesiones podría modularse en presencia de fenoles por activación del producto del gen Mec1/hATR. Se analizaron los posibles efectos protectores frente a dos tipos de radiaciones (gamma y UVC) a nivel celular, ya que  ciertas longitudes de onda  pueden  inducir  cascadas de óxido reducción, retardos en el tiempo de generación  celular y lesiones a nivel genómico. Se utilizaron como modelo eucariote cepas de Saccharomyces cerevisiae en fase exponencial: normales y mutantes deficientes en MEC1 y en la regulación de la sintesis de la ribonucleotido-reductasa: SC7 Klys 2-3 , WT (MATa ade2-101 his3D200 ura3DNco lys2DBgl CAN1), sml1 (MATa ade2-101 his3D200 ura3DNco lys2DBgl CAN1 sml1D::Kan), sml1/mec1(MATa ade2-101 his3D 200 ura3 DNcolys2DBgl CAN1sml1D:: Kan mec1D::Hyg). Como agentes con capacidad protectora: infusión de yerba mate, liofilizado de infusión de yerba mate caracterizado (Dra. R. Filip), ácido cafeico, 1,5 dicafeoil quinico. Se observó aumento de la probabilidad de sobrevida, disminución de la mutagénesis inducida y protección genómica con disminución de  roturas dobles  de ADN frente al daño producido por los diferentes agentes físicos utilizados. Estos resultados indican la interferencia de uno o más componentes de la infusión sobre  sistemas  redox  e interacción con vías de control del ciclo celular y de  reparación del ADN ( hATR/Mec1). Agradecimientos: Canarias SA, ANII, CSIC, INDT

Contacto: nbracesco@gmail.com
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| Conferencista invitado
Espectro de daños de ADN en células con inestabilidad genómica radioinducida (#0247)
Deborah Keszenman 1
1 - Laboratorio de Radiobiología Médica y Ambiental, PDU Biofisicoquímica, CENUR Litoral Norte, Salto, UDELAR.
Resumen:
El proceso de transformación maligna y la tumorigénesis implican una sucesión de alteraciones celulares, entre ellas la inestabilidad genómica. Esta, al igual que la carcinogénesis, es multifactorial y se propone como un sello distintivo del cáncer. Se caracteriza por diversos cambios que incluyen la reducción de la eficacia de clonación, alteraciones cromosómicas,  formación de micronúcleos y aumento de la frecuencia mutagénica. Es más, la inestabilidad genómica es considerada como una fuerza motora de la tumorigénesis. Por tanto, la comprensiòn de los mecanismos subyacentes a la iniciación y perpetuación de la inestabilidad genómica permitirá profundizar en los mecanismos subyacentes a la carcinogénesis. Durante el metabolismo celular normal se genera estrés oxidativo endógeno que puede producir daños aislados y agrupados en el ADN. Mientras que los daños esporádicos presentan alta probabilidad de ser reparados eficientemente, los daños agrupados pueden originar eventos citotóxicos y mutagénicos persistentes y dar lugar a inestabilidad genómica. Basados en la hipótesis de la presencia de signaturas de daños de ADN únicos al fenotipo de inestabilidad genómica, determinamos el espectro de daños agrupados del ADN usando clones celulares derivados de células únicas de la línea celular humano-hamster GM10115 sobrevivientes a diferentes tipos de radiaciones. Se determinaron las frecuencias de roturas dobles, daños agrupados de bases oxidadas y de sitios abásicos en la línea celular parental y clones estables e inestables que presentan inestabilidad genómica radioinducida. Se observó que los niveles de daños totales de ADN fueron similares, sin embargo, cada clon inestable mostró un espectro de daños persistentes únicos. Se especula que este espectro característico se vincula con alteraciones en la señalización y reparación de los daños de ADN subyacentes a la perpetuación de la inestabilidad genómica.  Coautores: Lucia Kolodiuk (Stony Brook University, NY, USA), Janet E. Baulch (Department of Radiation Oncology, University of California, Irvine, CA, USA).

Contacto: dkeszen@gmail.com
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12:30 - 14:00
ALMUERZO (CARPA C8)
14:00 - 15:30 SNU
PRESENTACIÓN POSTERS (C9) - SNU - #0327; #0102; #0158; #0060; #0059; #0266; #0244; #0078; #0023; #0250; #0020
| Póster | Oral - No
Caracterización del crecimiento de axones simpáticos postnatales en matrices 3D de colágeno tipo-I: relevancia de la rigidez (#0266)
Gabriela Vierci 1; Gaby Martínez 2; Nicolás Unsain 2; Ma Paula Latorre 1; Mónica Brauer 1; Analía Richeri 1
1 - Lab. de Biología Celular, IIBCE. 2 - Lab. de Neurobiología, IMMF, Universidad Nacional de Córdoba.
Resumen:
Una de las de propiedades físicas que puede cambiar en el microambiente de los axones es la rigidez de la matriz extracelular por donde transitan. Sin embargo, la influencia de la rigidez del sustrato sobre el crecimiento axonal es un campo que ha sido poco explorado. El colágeno-I, componente más abundante de la matriz extracelular, es ampliamente utilizado en ingeniería de tejidos para promover la regeneración de nervios periféricos. En este trabajo nos propusimos estudiar el efecto de la rigidez de matrices tridimensionales (3D) de colágeno-I sobre el crecimiento de los axones simpáticos, utilizando cultivos primarios de explantos de ganglio cervical superior de ratas postnatales. Los axones simpáticos fueron desafiados a crecer en un sustrato rígido generado por el tratamiento del colágeno con glicoaldheído (GA) y se evaluó su crecimiento por microscopía de fluorescencia a las 24 y 48 horas de cultivo. Los explantos crecidos en matrices-3D rígidas presentaron axones más cortos que en matrices controles. Esta inhibición del crecimiento axonal provocada por la rigidez se detecta tanto a las 24hs como a las 48hs. La morfología del cono de crecimiento de los axones (CC) también se vio afectada. A las 24hs, el 72% de los axones crecidos en matrices rígidas presentaba CCs colapsados, mientras que sólo un 40% de los CCs crecidos en matrices control mostraron esta morfología. A las 48hs, esta diferencia se acentuó aún más (CCs colapsados: 80% matrices-3D-rígidas vs 21% matrices-3D-control; p=0,0001). Estos resultados ponen de manifiesto la relevancia de la rigidez de las matrices de colágeno demostrando que los axones simpáticos enfrentados a un ambiente rígido crecen menos, a pesar de que este sea permisivo, viéndose afectado también el citoesqueleto de F-actina de la estructura axonal que sensa el ambiente.

Contacto: gabriela.vierci@gmail.com
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| Póster | Oral - No
Sintesis de derivados de quercetina para su posterior evaluación como antioxidantes (#0020)
Damian Ayala 1; Gabriel Sagrera 1
1 - Laboratorio de Síntesis Orgánica, Departamento de Química Orgánica, Facultad de Química.
Resumen:
Los flavonoides se encuentran ampliamente distribuidos en el reino vegetal y poseen diversas actividades biológicas, entre ellas antioxidantes, antimicrobianas y anticancerígenas. Son componentes importantes en la dieta humana, aunque se consideran como no nutrientes. Se estima que la ingesta diaria de flavonoides oscila entre 50 y 1000 mg, dependiendo del consumo de vegetales y frutas, vino tinto y té, aunque esta cantidad puede ser superior en personas que suplementan sus dietas con flavonoides. Se ha sugerido que los flavonoides deben poseer una toxicidad mínima si son ingeridos en las cantidades de una dieta típica vegetariana. Está ampliamente aceptado que los radicales libres oxigenados, conocidos como especies reactivas de oxígeno (ERO) son causantes de envejecimiento y diversas enfermedades degenerativas (enfermedad cardíaca, cataratas, disfunción cognitiva, cáncer). Los humanos poseen sistemas antioxidantes endógenos que brindan cierta protección contra radicales libres oxigenados. Sin embargo, debido a la eficiencia incompleta de los sistemas endógenos de defensa y la abundancia de algunas situaciones fisiopatológicas en donde se producen ERO en exceso, se necesitan antioxidantes presentes en la dieta para disminuir los efectos acumulativos del daño oxidativo. Con respecto a esto, diversos flavonoles, entre ellos la quercetina poseen actividad antioxidante. En el marco de un proyecto relacionado con la síntesis y evaluación biologica de flavonoides nos hemos propuesto la sintesis de una serie de flavonoles derivados de la quercetina para su posterior evaluacion como antioxidantes. Se prepararon en cuatro etapas: protección de los hidroxilos fenólicos de los precursores, condensación aldólica para formar 2’-hidroxichalconas, ciclación oxidativa y remoción de los grupos protectores. Los compuestos fueron obtenidos con buenos rendimientos y caracterizados por RMN y EM. En una etapa posterior se determinará la actividad antioxidante en una etapa posterior por decoloración del radical difenilpicrilhidrazilo (DPPH) e inhibición de la peroxidación lipidica (TBARS).  

Contacto: DA.AYALA475@gmail.com
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| Póster | Oral - No
EL HALOPERIDOL PROMUEVE EL SUEÑO DE ONDAS LENTAS DURANTE EL POSTPARTO DE LA RATA (#0023)
Florencia Noel Peña 1; Mayda Rivas 1; Joaquín Gonzalez 1; Annabel Ferreira 2; Pablo Torterolo 1; Luciana Benedetto 1
1 - Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad de la República. 2 - Departamento de Fisiología y Nutrición, Facultad de Ciencias, Universidad de la República.
Resumen:
El estímulo de succión provoca la eyección de leche (EL), un evento que se asocia al sueño de ondas lentas (SWS). La EL se puede medir indirectamente por la ganancia de peso de las crías (GPC), evento que no ocurre si las ratas madres se encuentran privadas de sueño. El Haloperidol (HAL) es un antagonista dopaminérgico que facilita la adopción de posturas de amamantamiento, la EL y la GPC en ratas madres, y promueve el SWS en ratas macho, un efecto que no ha sido determinado en hembras lactantes. Nuestro objetivo es determinar si el HAL promueve el SWS en ratas madres y si existe una correlación entre el SWS y la GPC. Se trataron ratas madres (n=6), previamente implantadas para registros polisomnográficos, con HAL (0.4 mg/kg, i.p.) o vehículo. El tratamiento se realizó tres horas después de la separación de la camada (cuatro machos, cuatro hembras) de la madre y una hora antes de su reunión, entre los días 6-8 postparto. Luego de su reunión, se realizaron registros de sueño-vigilia y se pesó el total de la camada inmediatamente antes y después de los registros. Los resultados preliminares muestran que las camadas de madres tratadas con HAL tienden a ganar más peso (9.1 ± 1.8 g) que las de madres control (5.5 ± 0.7 g, p=0.063). Además, el HAL incrementa el tiempo en SWS (127.5 ± 13.4 min) comparado con el vehículo (87.4 ± 4.7 min, p=0.029). Finalmente, el SWS tiene una tendencia a estar positivamente correlacionado con la GPC después del tratamiento con HAL (r=0.94, p=0.054). Estos resultados sugieren que el HAL podría facilitar la GPC, no solo por promover el amamantamiento, sino porque facilita el SWS.

Contacto: Flo.-21@hotmail.com
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| Póster | Oral - Si
Respuesta de evitación de interferencia durante el comportamiento agonístico de una especie de pez eléctrico de pulso. (#0059)
Rossana Perrone 1; Federico Pedraja 2
1 - Unidad Bases Neurales de la Conducta, Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable. 2 - Faculty of Biology & CITEC, AG Active Sensing, Bielefeld University.
Resumen:
La descarga del órgano eléctrico (DOE) de los peces eléctricos tiene una doble función: percibir el mundo circundante y comunicarse con sus coespecíficos. Estas dos funciones, al usar el mismo canal, interactúan y pueden generar interferencia. Los peces eléctricos desarrollaron un sofisticado comportamiento eléctrico para evitar la interferencia de DOEs de coespecíficos, la Respuesta de Evitación de Interferencia (JAR por sus siglas en inglés) que ha sido muy bien estudiada especialmente en peces de onda. Gymnotus omarorum es un pez eléctrico de pulso, solitario y altamente agresivo que presenta agresión territorial fuera del período reproductivo. En esta especie, al finalizar el encuentro agonístico, el dominante presenta mayor frecuencia que el subordinado, debido a que éste último baja su frecuencia como señal de sumisión eléctrica. Estudiamos la JAR cuantificando número de coincidencias entre las DOEs de ambos peces durante encuentros agonísticos en condiciones de libre movimiento, tomando muestras al azar de pocos segundos de duración antes y luego de resuelto el conflicto. Trabajos previos de nuestro grupo mostraron que la vasotocina, neuropéptido implicado en el comportamiento agonístico, afecta las señales eléctricas de sumisión de Gymnotus omarorum. Exploramos la acción de vasotocina y el antagonista del receptor de vasotocina Compuesto de Manning (MC) sobre la JAR. Resultados preliminares mostraron que después de un encuentro agonístico, la tasa de coincidencias de las DOEs es mayor para subordinados que para dominantes en condiciones control, y que este aumento en la tasa de coincidencias para los subordinados es revertido cuando se administra MC a los dominantes. Se diseñó un protocolo experimental que permite analizar las coincidencias de las DOEs de ambos peces en movimiento restringido, antes y después del encuentro agonístico, en condición control y con Vasotocina y MC, con el fin de validar los resultados preliminares mediante registros más estables y de mayor duración.

Contacto: rossanaperrone@gmail.com
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| Póster | Oral - No
Análisis cuali-cuantitativo de muestras incautadas de pasta base de cocaína (PBC). Caracterización química del producto de volatilización y su relevancia en la salud humana (#0060)
Cecilia Scorza 1; Marcela Martínez 2; Martín Galvalisi 1; José Pedro Prieto 1; Juan Andrés Abin Carriquiry 2
1 - Departamento de Neurofarmacología Experimental del IIBCE. 2 - Departamento de Neuroquímica y Plataforma de Servicios Analíticos del IIBCE.
Resumen:
PBC es una droga de abuso que se comercializa generalmente adulterada y cuya vía de administración es la inhalación pulmonar. Su consumo crónico genera una fuerte dependencia, alteraciones fisiológicas/comportamentales y toxicidad. Se especula que la vía de administración podría explicar dicho perfil aunque hipotetizamos que la influencia de los adulterantes no debe ser desestimada. Datos forenses de la composición química actual de muestras incautadas de PBC no han sido reportados y la presencia de adulterantes y/o productos de su combustión en el humo inhalado por sus consumidores no ha sido comprobada. Mediante cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masa (GC-MS) analizamos químicamente 306 muestras de PBC incautadas en 2014-2015,  donadas por el Instituto Técnico Forense (Uruguay). Además, determinamos la composición química de muestras de PBC volatilizadas, con y sin adulterar, así como la presencia de los adulterantes encontrados luego de su volatilización. La temperatura de volatilización de las muestras volatilizadas fue registrada mediante Termocupla. El 90% de las muestras analizadas estaban adulteradas. Fenacetina, cafeína y aminopirina aparecieron en un 76, 64 y 27 %, respectivamente. Un 54.2% de muestras estaban adulteradas con la combinación de cocaína, cafeína y fenacetina (30% por cada sustancia). Fenacetina y cafeína se volatilizaron a una temperatura promedio de 327 ºC y 290 ºC, respectivamente, y ambos espectros de masa demostraron su integridad química y la ausencia de productos de pirolisis. PBC adulterada con fenacetina o cafeína se volatilizó 285 y 220 ºC, respectivamente, y PBC no adulterada a 268 ºC. Anhidro-ecgonina-metilester, acido benzoico y carbometoxi-cicloheptatrienos aparecieron en ambos tipos de muestras de PBC volatilizadas. Nuestros datos reflejan lo consumido en el periodo analizado e indican que los adulterantes persisten en el humo sin descomponerse luego de su volatilización, sugiriendo que, en el consumo de PBC es relevante considerar su impacto en la salud humana. 

Contacto: cscorza@iibce.edu.uy
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| Póster | Oral - No
Análisis funcional de la vía Slit-Robo durante la diferenciación de las células ganglionares de la retina (#0102)
Camila Davison 1; Flavio R. Zolessi 1
1 - Laboratorio de Biología Celular del Desarrollo Neural, Institut Pasteur de Montevideo/Sección Biología Celular, Facultad de Ciencias, Universidad de la República.
Resumen:
La vía de señalización mediada por los factores Slit y sus receptores Robo regula una gran gama de procesos durante el desarrollo. Una de sus funciones mejor conocidas es como una señal repulsiva para el crecimiento axonal de las células ganglionares de la retina (CGRs), pero su rol en la polarización de estas células no ha sido estudiado adecuadamente. En este trabajo nos planteamos ampliar la caracterización funcional de esta vía de señalización durante la diferenciación de las CGRs en el pez cebra, concentrándonos en Slit2 y Robo2 como principales candidatos en estas células. El bloqueo de expresión de slit2 fue realizado haciendo uso del sistema CRISPR/Cas9. La mutación de este gen se da en forma de mosaico en la primera generación y, en estos embriones, no ocasiona defectos morfológicos externos notorios. El análisis mediante microscopía confocal revela errores de guía axonal de las CGRs tanto fuera como dentro del territorio retiniano, con una gran proporción de errores en el quiasma óptico y una menor cantidad de errores dentro de la retina. Este fenotipo es muy similar al observado en los embriones homocigotas mutantes de la segunda generación. El bloqueo del receptor  Robo2 por medio de una forma dominante negativa también produce errores de guía axonal dentro de la retina, pero más frecuentemente. En este caso, la cantidad de axones desviados es mayor, y los mismos no se extienden más allá de la capa plexiforme interna. En ambos casos, el crecimiento inicial de los axones hacia la lámina basal indica que la orientación neuronal ocurre correctamente. Nuestros resultados indican que tanto Slit2 como Robo2 median la inhibición del crecimiento axonal de las CGRs dentro de la retina en el pez cebra, pero no cumplen un rol esencial en la orientación neuronal, al menos de forma aislada.

Contacto: cdavison@pasteur.edu.uy
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| Póster | Oral - No
Caracterización de la actividad neuronal en el área preóptica media durante el período postparto y su modulación por las hipocretinas. (#0078)
Mayda Rivas 1; Luciana Benedetto 2; Annabel Ferreira 3; Claudia Pascovich 2; Pablo Torterolo 2
1 - Laboratorio de Neurobiología del Sueño, Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay.. 2 - Laboratorio de Neurobiología del Sueño, Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay. 3 - Sección de Fisiología y Nutrición, Facultad de Ciencias, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay.
Resumen:
El área preóptica media (mPOA) es crucial para la regulación del sueño y el comportamiento maternal. Esta área recibe proyecciones de las neuronas hipocretinérgicas, localizadas en el hipotálamo postero-lateral e involucradas en la promoción de la vigilia. Recientemente hemos demostrado que la hipocretina-1 (HCRT) en el mPOA facilita el comportamiento maternal. El objetivo de este estudio es describir la actividad eléctrica basal de neuronas del mPOA, su relación con las características del electroencefalograma (EEG) y su modulación por HCRT en ratas lactantes. Los registros extracelulares de neuronas en el mPOA se realizaron bajo anestesia con uretano. La microinyección yuxtacelular de HCRT se realizó por presión utilizando micropipetas dobles. Registramos 45 neuronas en el mPOA con las siguientes características electrofisiológicas: duración media del potencial de acción de 2,40 ± 0,09 ms, frecuencia de descarga basal de 5,98 ± 0,98 Hz (rango: 0,27 - 28,29) y coeficiente de variación de 0,77 ± 0,09. Encontramos 12 neuronas con actividad relacionada al EEG, de las cuales 10 aumentaron su actividad durante la desincronización del EEG (“DES-ON”) y dos lo hicieron durante la fase sincronizada (“SIN-ON”). De 19 neuronas inyectadas, la HCRT disminuyó la frecuencia de descarga en 10 neuronas de 4,30 ± 0,65 a 2,76 ± 0,47 Hz, aumentó en siete neuronas de 3,05 ± 0,53 a 5,90 ± 0,97 Hz y en dos no tuvo efecto. De las neuronas inyectadas tres se relacionaron con el EEG, dos del tipo “SIN-ON” disminuyeron su frecuencia con HCRT y una neurona “DES-ON” aumentó su frecuencia con HCRT. Nuestros datos preliminares muestran una población neuronal electrofisiológicamente heterogénea en el mPOA de ratas posparto y que los efectos de la HCRT variaron según el tipo de neurona sugiriendo una función promotora de vigilia en las neuronas relacionadas con el EEG.

Contacto: rivas.mayda@gmail.com
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| Póster | Oral - No
Estudio de la expresión de Fra-2 en un modelo de desinhibición GABAérgica en el núcleo anterior del tálamo y su relevancia en la psicosis (#0158)
Ximena López 1; Analía Richeri 2; Ronald McGregor 3; Cecilia Scorza 1
1 - Departamento de Neurofarmacología Experimental-IIBCE. 2 - Laboratorio de Biología Celular-IIBCE. 3 - Department of Psychiatry and Brain Research Institute, UCLA School of Medicine.
Resumen:
La sintomatología positiva o psicótica es una de las alteraciones más graves de la esquizofrenia. Se han reportado disfunciones en el circuito cortico-talámico-cortical aunque es necesario estudiar la participación específica de las diferentes áreas y sus proyecciones. Mediante el uso del modelo farmacológico de esquizofrenia del antagonismo de receptores N-metil-D-aspartato (NMDA), hemos reportado que el núcleo anterior del tálamo (ATn) es un sustrato clave en la acción sistémica del antagonista NMDA, MK-801, para la inducción de comportamientos tipo-psicotomiméticos. Además, demostramos que un mecanismo de desinhibición GABAérgica del ATn subyacería al efecto comportamental, sugiriendo que existe un balance excitatorio/inhibitorio alterado vía desinhibición de inputs GABAérgicos del núcleo reticular del tálamo, nRT  hacia neuronas del nAT (principal input GABAérgico) generando una excitación en sus principales regiones de proyección: corteza retrosplenial (RSC) e Hipocampo (Hc). En este trabajo imitamos la desinhibición GABAérgica del ATn, mediante la microinfusión bilateral de bicuculina (antagonista GABAA; 100 ng/0.2ml/min) en ratas canuladas e investigamos la expresión de Fra-2 (marcador de actividad neuronal) por inmunohistoquímica en la RSC (rostral y caudal) e Hc (giro dentado, GD; CA1 y subículo). Evaluamos las conductas tipo-psicotomiméticas (software Ethovision XT) y los resultados se compararon con los efectos inducidos por la administración sistémica intraperitoneal (i.p.) de MK-801 (0.2 mg/kg) o salino (control). A diferencia de lo observado para MK-801, los comportamientos tipo-psicotomiméticos fueron parcialmente inducidos por bicuculina intra-ATn sugiriendo que el bloqueo GABAA intra-ATn no modela completamente la acción sistémica de MK-801. Bicuculina intra-ATn no modificó el número de células Fra-2 positivas en la RSC rostral y caudal vs. salino intra-ATn (control), mientras que únicamente lo aumentó significativamente en el GD. MK-801 tendió a aumentar levemente la expresión de Fra-2 en RSC y en GD. Nuestros resultados colaboran en la comprensión de la neurobiología que subyace a la sintomatología positiva de la esquizofrenia.  

Contacto: ximelopezhill@hotmail.com
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| Póster | Oral - No
Caracterización de cambios estructurales en áreas neurales neurales involucradas en la expresión y flexibilidad del comportamiento maternal en ratas (#0244)
Marcela Ferreño 1; Natalia Uriarte 1; Javier Nogueira 2
1 - Facultad de Ciencias. 2 - Facultad de Medicina.
Resumen:
En los mamíferos, el periparto representa un importante período de plasticidad comportamental. Si bien en la literatura existe información acerca de cambios estructurales plásticos en el sistema nervioso (SN) en ratas lactantes, ésta se centra principalmente en estructuras hipocampales y en momentos puntuales (inicio de la lactancia). Las redes perineuronales (PNNs) constituyen un tipo de matriz extracelular especializada formada principalmente por proteoglicanos que rodea muchos somas, dendritas proximales y los segmentos iniciales de algunos axones del SN central, conformando una estructura tipo red con “agujeros” en los sitios de contacto sináptico. Su formación es detectada relativamente tarde en el desarrollo cuando el circuito sináptico del SNC se establece y madura. Si bien se postula a la maternidad como un período de gran plasticidad, se desconoce cómo es la expresión de las PNNs durante este período. El objetivo de este estudio fue investigar la estructura de las PNNs en regiones del SNC del circuito maternal en ratas madres a lo largo del posparto. Así, se evaluaron los siguientes grupos experimentales: 1) Hembras primíparas en posparto temprano (día 2), 2) Hembras primíparas en posparto tardío (día 22) y 3) Hembras ciclantes en diestro. Encontramos que la estructura de las PNNs difiere entre ratas vírgenes y lactantes en el período posparto temprano a nivel del área preóptica media (mPOA). La marca para glucosaminoglicanos obtenida mediante la utilización de la lectina de Wisteria Floribunda es difusa y tenue en las hembras vírgenes en diestro mientras que observamos redes claramente definidas en el día 2 posparto. De forma interesante, hacia el final del período posparto, esta estructura muestra un perfil similar al de las hembras ciclantes. Estas diferencias podrían estar asociadas a cambios en los niveles de plasticidad del mPOA subyacentes a la dinámica de la expresión del CM a lo largo del posparto.  

Contacto: marcelaferreno@gmail.com
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| Póster | Oral - Si
RELACIÓN ENTRE MALESTAR PSICOLÓGICO Y CONSUMO DE ALCOHOL EN JÓVENES URUGUAYOS (#0250)
Paul Ruiz 1; Angelina Pilatti 2; Ricardo Pautassi 2
1 - Centro de Investigación Clínica, Facultad de Psicología, UdelaR. 2 - Facultad de Psicología, UNC.
Resumen:
Poco se sabe sobre la epidemiología del consumo de alcohol en jóvenes uruguayos, y menos sobre los factores que promueven este consumo. El malestar psicológico, una sensación subjetiva de alto nivel de estrés, desmoralización, discomfort o desasosiego, facilita la emergencia de enfermedades mentales, incluidos los trastornos por consumo de sustancias. Este trabajo analizó, en una muestra de 1527 jóvenes uruguayos de 18 a 30 años (74% mujeres), la relación entre malestar psicológico y consumo de alcohol. Esta franja etaria es la de mayor prevalencia de abuso y dependencia al alcohol. Los participantes completaron una encuesta online que incluía instrumentos para medir malestar psicológico (Kessler), patrón perjudicial de consumo de alcohol (AUDIT) y consecuencias negativas derivadas del uso de alcohol (YAACQ). Se observó una correlación significativa entre malestar psicológico y los puntajes de AUDIT y YAACQ. Estos resultados sugieren que el malestar psicológico aumenta la vulnerabilidad al abuso y consecuencias negativas del alcohol.

Contacto: paulruiz@psico.edu.uy
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| Póster | Oral - Si
Acoplamiento local y desacoplamiento de largo rango caracterizan a la actividad gamma (30-100 Hz) cortical durante el sueño REM (#0327)
Matías Cavelli 1; Giovanna Zoccoli 2; Alessandro Silvani 2; Santiago Castro-Zaballa 1; Natalia Schwarzkopf 1; Noelia Velásquez 1; Joaquín Gonzalez 1; Alejandra Mondino 1; Noelia Santana 1; Atilio Falconi 1; Pablo Torterolo 1
1 - Laboratorio de Neurobiología del Sueño, Departamento de Fisiología, Facultad de Medicina, Universidad de la República, Montevideo, Uruguay.. 2 - Department of Biomedical and Neuromotor Sciences Alma Mater Studiorum - Università di Bologna, Bologna, Italy..
Resumen:
En mamíferos se distinguen tres estados comportamentales: vigilia, sueño lento y sueño REM (sREM). La vigilia se caracteriza por ondas eléctricas de baja amplitud y alta frecuencia del electroencefalograma (EEG). El sueño lento presenta ritmos eléctricos lentos y de mayor amplitud donde la actividad cognitiva es prácticamente nula. El sREM o "paradójico" en cambio, se caracteriza por una actividad de mayor frecuencia y menor amplitud similar a la vigilia, existiendo una completa pérdida del tono muscular; en esta etapa es donde principalmente ocurren los sueños (actividad onírica). A las oscilaciones del EEG que se observan en el rango de frecuencia de 30 a 100 Hz se le denomina actividad u oscilaciones gamma. Las oscilaciones gamma se encuentran fuertemente vinculadas a las funciones cognitivas e incluso se postula que la coherencia gamma entre áreas distantes de la corteza es un correlato neural de la percepción unificada y consiente. Utilizando los análisis de potencia y coherencia espectral electroencefalográfica entre áreas cerebrales, como índices de sincronización local y de largo rango, respectivamente; mostramos en 3 modelos animales (gato, rata y ratón) que, durante el sREM, a pesar de presentar actividad gamma local similar a la vigilia, existe un desacople entre sitios neocorticales distantes a esta frecuencia.Conclusión. Durante el sREM, a pesar de tener un EEG localmente activado, existe un desacople de la actividad gamma de frecuencias entre áreas de la neocorteza. Por tanto, las interacciones funcionales entre áreas corticales distantes, que son fundamentales para las funciones cognitivas, son diferentes durante la vigilia y el sREM. Dado que este acoplamiento y desacoplamiento de corto y largo alcance entre áreas corticales, en la banda gamma de frecuencias, se observan en felinos, roedores y también en humanos, consideramos que este es un rasgo característico y conservado del sREM en mamíferos.

Contacto: mat.cavelli@gmail.com
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CONFERENCIA PLENARIA
17:00 - 17:30