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domingo
14:00 - 15:30 SUMI
PRESENTACIÓN POSTERS (C9) - SUMI - #0094, #0364, #0361
| Póster | Oral - Si
Subnutrition during pregnancy and lactation increases GDNF immunoexpression at stages VII of seminiferous tubules, affecting spermatogenesis in adult rat testes (#0094)
Graciela Pedrana 1; Alejandra Díaz Traverso 1; Paula Lombide 1; Helen Viotti 1; Daniel Cavestany 2; Deborah Sloboda 3
1 - Área Histología y Embriología, Facultad de Veterinaria. 2 - Área de Teriogenología, Facultad de Veterinaria. 3 - Biochemistry & Biomedical Science, Mc Master University.
Resumen:
During fetal life many programming factors such as subnutrition are able to modify the intrauterine environment determining permanent changes in adult life. Concerning reproduction, growth factors such as glial cell derived neurotrophic factor (GDNF) emerge as a potential factor that could mediate these adjustments. GDNF is known to regulate the decisions of the cellular fate of the spermatogonial stem cells (SSC) through a paracrin regulation. It is not yet determined whether subnutrition during developmental windows periods modulates the expression of this factor. Therefore, the objective was to determine whether subnutrition during pregnancy (UNP), lactation (UNL) or pregnancy / lactation (UNPL) modify GDNF expression in the adult testis. Testicular rat’s samples were processed and immunohistochemical technique using rabbit polyclonal anti GNDF was performed. Immunostaining area and intensity of GDNF immunoexpression (%) were measured. In addition, frequency of stages of the seminiferous cycle was determined and correlated with GDNF immunoexpression. In all cases, significance were considered to be P <0.05. The percentage of immunostaining area and the intensity of GDNF immunostaining were higher in the UNP and UNL group compared to the control group (p <0.0001). Our results showed an overexpression of GNDF during stage VII and VIII. Normally, GDNF protein is secreted by Sertoli cells maximized between XIII-I of spermatogenic stage cycle, and decreasing towards stage VII. Previous studies in mice demonstrate that testes over expressing GDNF were infertile, and develop testicular tumors. A complex process, the spermiation occurs at the beginning of stage VII in the rat, and is completed towards the end of stage VIII. Consequently, we suggest that subnutrition during lactation, and pregnancy modified GDNF expression that disturb spermatogenesis, particularly at stages were spermiation occurs within seminiferous cycle in adult animal testes. In conclusion, subnutrition during key periods of development increased GDNF with deleterious consequences on spermatogenesis.

Contacto: gpedrana@gmail.com
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| Póster | Oral - No
RESPUESTA ASTROCITARIA A LA COEXISTENCIA DE LA DEFICIENCIA DE HIERRO Y ALCOHOL (#0364)
Mariana Perata 1; Eugenia Isasi 1; Silvia Olivera-Bravo 1
1 - IIBCE.
Resumen:
El neurodesarrollo y las células neurales son blancos preferenciales de la deficiencia de hierro (DH) y del alcohol. La DH es la condición nutricional más prevalente afectando fundamentalmente a mujeres en edad fértil y sus hijos desde la gestación hasta la adolescencia temprana. Por su parte, el consumo abusivo de alcohol es responsable del 1% de las enfermedades neonatales no atribuibles a causas genéticas y de casi el 6% de las muertes mundiales. La DH y el alcohol alteran irreversiblemente al sistema nervioso central. Sin embargo son poco conocidos sus efectos combinados sobre las células gliales que son determinantes para la perpetuación del daño al SNC. Nuestro grupo ha analizado los efectos de DH-alcohol exponiendo astrocitos corticales neonatales al quelante de hierro desferroxamina (DFO, 25 µM, 96 h) y a etanol (100 mM, 24 h) y luego co-cultivado con neuronas y oligodendrocitos. La coexistencia DFO-alcohol provocó una disminución significativa del potencial y la funcionalidad mitocondrial además de un descenso en los niveles de glutatión en astrocitos. Sin embargo, DFO-alcohol bloqueó el aumento de estrés oxidativo producido por alcohol y las alteraciones del citoesqueleto de actina ocasionadas por DFO. La sobrevida de neuronas hipocampales co-cultivadas sobre astrocitos DH-alcohol fue la menor de todas las condiciones (80% del control). DFO y DFO-alcohol disminuyeron la sobrevida de oligodendrocitos en igual porcentaje, pero DFO-alcohol afectó además la morfología de los oligodendrocitos supervivientes. Nuestros resultados muestran que la DH y el alcohol alteran el fenotipo astrocitario actuando sinérgicamente sobre algunas respuestas y antagonizando otras. Sin embargo, la co-existencia DH-alcohol en astrocitos tuvo la mayor repercusión negativa sobre la viabilidad de neuronas y oligodendrocitos, lo que podría explicar el agravamiento de los efectos negativos sobre la sinaptogénesis y la mielinización cuando coexisten ambas condiciones.

Contacto: solivera2011@gmail.com
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| Póster | Oral - No
AUTOMATIZACIÓN DE LA ADQUISICIÓN  Y ANÁLISIS DE IMÁGENES DE CÉLULAS DE FROTIS SANGUÍNEOS. (#0361)
Erik Winiarski 1; Alexandra Ferrer 1; Mauricio Ramos 2; Federico Lecumberry 2; Rossana Sapiro 1
1 - Facultad de Medicina. 2 - Facultad de Ingeniería.
Resumen:
El análisis de células mediante microscopía óptica (MO) es utilizado en diversas áreas de enseñanza, diagnóstico e investigación. Durante años el análisis cuantitativo y cualitativo de células al MO se realizó manualmente pero actualmente es posible realizarlo mediante algoritmos programables manipulando grandes cantidades de datos en poco tiempo. En el 2016 se realizó una actividad de Extensión en el Liceo N2 de Minas, Lavalleja con el objetivo de aproximar a estudiantes de secundaria a las técnicas histológicas de rutina y al análisis microscópico de las células.En esta experiencia se observaron y analizaron frotis de sangre. La actividad tuvo muy buena recepción por parte de los participantes, sin embargo, los docentes manifestaron que la identificación manual de células al MO conlleva un tiempo considerable. Si bien actualmente existen programas comerciales que detectan automáticamente variedades celulares, estos son muy costosos y no se encuentran disponibles rutinariamente.En este trabajo proponemos validar variables cuantitativas y cualitativas de reconocimiento celular, a través de imágenes obtenidas con MO. Se utilizaron frotis de sangre teñidas con técnicas histológicas de rutina. Se utilizó un programa de acceso libre (FIJI). Las variables seleccionadas para reconocer las células fueron: forma, contraste, tamaño de núcleo y contraste del citoplasma de neutrófilos. Los resultados preliminares muestran que existen varias posibilidades que permiten contabilizar variedades celulares. Una herramienta del programa contabiliza múltiples tipos celulares de forma manual. Este procedimiento no difiere de los utilizados actualmente por lo que no implicaría un gran impacto. Otra herramienta semi automatizada que brinda FIJI son los Macros, que permitan el análisis de ¨partículas¨. El operador la programa y luego puede ser reproducida en diversas imágenes obteniendo resultados muy similares.Concluimos que esta segunda herramienta permitiría optimizar tiempos y estandarizar procesos, no solo dentro del área biológica sino también en otros campos de estudio.

Contacto: erikwini21@gmail.com
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